家蚕亲环蛋白A基因(BmCyPA)的克隆与表达分析

编号 zgly0001399753

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕亲环蛋白A基因(BmCyPA)的克隆与表达分析

作者 王丹  唐田娟  刘悦  吕正兵  陈健  盛清  刘立丽  张文平  聂作明  全滟平  吴祥甫  张耀洲 

作者单位 浙江理工大学生物化学研究所浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室  浙江经贸职业技术学院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2011年05期

年份 2011 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  亲环蛋白A  基因克隆  组织表达  亚细胞定位 

文摘内容 亲环蛋白(CyP)能与免疫抑制剂环孢霉素A(CsA)结合而作为CsA的胞内受体。在已构建的家蚕蛹cDNA文库中获得了家蚕亲环蛋白A(BmCyPA)基因的cDNA序列。利用生物信息学方法对此序列的开放阅读框(ORF)和序列同源性等进行分析,并以家蚕蛹总RNA反转录的cDNA为材料克隆了BmCyPA,通过原核表达目的蛋白后,将纯化的BmCyPA融合蛋白免疫新西兰兔得到抗血清,Western blotting检测目的蛋白在蚕体中得到表达。利用荧光定量PCR方法检测家蚕5龄幼虫各组织中BmCyPA mRNA的转录水平,由高到低依次为脂肪体、丝腺、中肠、马氏管、表皮、头部、气门、卵巢;Western blotting检测BmCyPA在5龄幼虫各组织中的表达水平,由高到低依次为脂肪体、气门、表皮、马氏管、中肠、丝腺、头部和卵巢。亚细胞定位显示Bm-CyPA在细胞质与细胞核中均有分布。推测BmCyPA与家蚕的生长发育以及促进蛋白质折叠和介导免疫应答等有密切联系。