杧果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B克隆与敲除载体构建

编号 zgly0001545307

文献类型 期刊论文

文献题名 杧果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B克隆与敲除载体构建

作者 张恺莉  蒲金基  张贺  周芳雪  杨永利  刘娅楠  刘晓妹 

作者单位 海南大学环境与植物保护学院/海南大学热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室  中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室 

母体文献 中国南方果树 

年卷期 2017年01期

年份 2017 

分类号 S436.67 

关键词 杧果  胶孢炭疽菌  内切葡聚糖酶CgEg1B基因  克隆  敲除载体 

文摘内容 为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与杧果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides致病力的关系,本试验以杧果炭疽病菌DNA为模板,利用同源克隆技术扩增CgEg1B,对其序列特征、蛋白保守结构域进行分析,并借助In-Fusion HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明,该基因DNA和cDNA全长分别为1 077bp、1 020bp,编码区有内含子(57bp)1个,推测编码339个氨基酸,其分子量约为37.13kDa,等电点PI为5.11。与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对,发现该序列与鳄梨炭疽菌C.gloeosporioides(EQB54542.1)的内切葡聚糖酶基因相似性为99%;该基因的敲除载体pCgEg1BGH-1构建成功。CgEg1B基因具备真菌内切葡聚糖酶基因家族的序列特征,推测CgEg1B基因可能与杧果炭疽病菌的侵入、定殖和致病性有关。