碱胁迫应答基因GsARHP的克隆及转基因紫花苜蓿的耐碱性分析

编号 zgly0001624098

文献类型 期刊论文

文献题名 碱胁迫应答基因GsARHP的克隆及转基因紫花苜蓿的耐碱性分析

作者 陈冉冉  朱娉慧  贾博为  宋雪薇  王子君  李佶娜  李强  丁晓东  朱延明 

作者单位 东北农业大学农业生物功能基因重点实验室 

母体文献 草业学报 

年卷期 2017年09期

年份 2017 

分类号 Q943.2  S541.9 

关键词 野生大豆  GsARHP基因  碱胁迫  紫花苜蓿  遗传转化 

文摘内容 本研究基于实验室前期野生大豆碱胁迫转录组数据,筛选出一个碱胁迫下上调表达的假定蛋白基因,暂命名为GsARHP(alkali stress related hypothetical protein gene)。首先利用Real-time PCR方法验证了GsARHP基因受碱胁迫诱导表达。生物信息学分析表明,该基因编码一个含有130个氨基酸的亲水蛋白,含有信号肽但无跨膜结构域;构建了GsARHP植物超量表达载体,利用农杆菌介导的子叶节侵染法转化肇东紫花苜蓿,通过PCR,Southern Blot和RT-PCR方法检测获得了3个超量表达GsARHP基因的转基因株系,并对其耐碱性进行了分析。结果表明,在0,100和150mmol/L NaHCO3处理14d后,非转基因株系明显萎蔫、黄化甚至死亡,而转基因株系则长势良好;进一步分析其生理指标显示,相对质膜透性与丙二醛含量均显著低于非转基因株系(P<0.01),而叶绿素含量与CAT活性显著高于非转基因株系(P<0.01),说明GsARHP基因的超量表达可以增强紫花苜蓿的耐碱能力。