一种芦笋胆固醇C-22羟化酶异源表达载体构建方法

申请号 CN202210636737.7

专利名称 一种芦笋胆固醇C-22羟化酶异源表达载体构建方法

专利类型 发明 

年份 2022 

公开号 CN115386584A

公开日 2022.11.25

主分类号 C12N15/53

分类号 C12N15/70  C12N15/54  C12N15/53 

申请日 2022.06.07

申请人 云南农业大学  四川省农业科学院经济作物育种栽培研究所 

国家省市 云南 

联系地址 650225 云南省昆明市盘龙区金黑公路95号

发明人 林春  刘正杰  董玉梅  毛自朝  张永辉  黄玲  成钦  黎玉萍  吴贺 

代理人 胡亚兰

代理机构 昆明金科智诚知识产权代理事务所(普通合伙) 53216

内容摘要 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种芦笋胆固醇C?22羟化酶异源表达载体构建方法，所述AoCYP90B27基因的核苷酸序列为SEQIDNO：1；所述异源表达载体构建方法包括：以多年生芦笋根部组织提取总RNA，以芦笋cDNA为模板进行CDS扩增，测序，比对；以送测序的PET?AoCYP90B27T载体为模板，用引物进行片段扩增，并将扩增产物进行胶回收；对扩增片段和原始载体进行线性化，室温连接；将连接产物进行转化，培养，提取表达质粒Pcfp?AoCYP90B27；利用模板进行扩增，线性化，连接转化，培养，提取最终的表达质粒Pcp?AoCYP90B27?gpdterminator。

主权利要求 1.一种AoCYP90B27基因，其特征在于，所述AoCYP90B27基因的核苷酸序列为SEQ IDNO：1。

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