东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的表达、纯化及抑菌活性分析

编号 zgly0000773333

文献类型 期刊论文

文献题名 东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的表达、纯化及抑菌活性分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 郭娜  肖向红  徐义刚  柴龙会  张晶钰 

作者单位 东北林业大学野生动物资源学院/国家林业局野生动物保护学重点开放性实验室  黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心 

母体文献 中国农业科学 

年卷期 2011,44(15)

页码 3246-3251

年份 2011 

分类号 S865.9 

关键词 东北林蛙  抗菌肽  毕赤酵母  抑菌活性 

文摘内容 【目的】利用毕赤酵母菌真核表达系统重组表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST, 分析评价dybowskin-1ST的抑菌活性。【方法】采用TRIzol法提取蛙皮总RNA, 经RT-PCR扩增获得抗菌肤dybowskin-1ST基因, 将目的基因克隆到毕赤酵母菌分泌型表达质粒pPIC9K中, 得到重组质粒pPIC9K-1ST。经电转化将pPIC9K-1ST转入到毕赤酵母菌GS115中, 获得高效表达dybowskin-1ST的重组菌株。以甲醇诱导重组菌株, 上清液经SDS—PAGE检测表明有目的蛋白dybowskin-1ST分泌表达。目的蛋白经Ni-agarose色谱柱分离纯化后, 对大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肠炎沙门氏菌和蜡状芽孢杆菌进行抑菌活性分析。【结果】成功构建了东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的毕赤酵母真核表达系统, 且dybowskin-1ST对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有良好的抑菌效果。【结论】东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST具有良好的广谱抗菌活性和潜在的研发价值。