东北林蛙皮肤抗菌肽基因在毕赤酵母中表达条件的优化

编号 zgly0001447976

文献类型 期刊论文

文献题名 东北林蛙皮肤抗菌肽基因在毕赤酵母中表达条件的优化

作者 崔绍鹏  周旋  朱熬  肖向红  张晶钰 

作者单位 东北林业大学野生动物资源学院 

母体文献 野生动物 

年卷期 2013年01期

年份 2013 

分类号 Q78 

关键词 抗菌肽  毕赤酵母  表达条件 

文摘内容 目的:确定毕赤酵母表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST基因的最佳诱导表达条件。方法:本研究将PCR合成的dybowskin-1ST基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建pPIC9K-dybowskin-1ST诱导型表达载体。表达载体经线性化后转化巴斯德毕赤酵母GS115,应用BMMY培养基诱导表达。采用单一变量法及正交试验法,对甲醇诱导的浓度、时间和温度进行了优化,通过SDS-PAGE电泳分析和体外抑菌试验检测目的肽表达丰度。结果:最佳诱导条件:甲醇终浓度为0.5%、诱导时间为72 h、诱导温度为28℃,在此条件下表达产物SDS-PAGE电泳条带灰度值为117,抑菌环直径为28.16mm,可为规模化的抗菌肽表达提供参考数据。