福建含笑ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0000629127

文献类型 期刊论文

文献题名 福建含笑ISSR-PCR反应体系的建立与优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 黄宇  陈礼光  夏海涛  荣俊冬  孔玲  廖鹏辉  郑郁善 

作者单位 福建农林大学工业原料林研究所 

母体文献 福建林学院学报 

年卷期 2009,29(2)

页码 144-148

年份 2009 

分类号 S823  S791.27 

关键词 福建含笑  ISSR-PCR  体系优化 

文摘内容 以福建含笑叶片提取的基因组DNA为材料,对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素,如dNTPs浓度、Mg^2＋浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量以及退火温度等指标进行筛选和优化,确立了可用于福建含笑ISSR-PCR分析最适宜的PCR反应条件：20μL PCR反应体积中含0.4 mmol·L^-1dNTPs,2.5 mmol·L^-1Mg^2＋,1.5 UTaqDNA聚合酶,0.6μmol·μL^-1引物,30 ng模板DNA。PCR扩增程序：94℃预变性2 min,94℃变性30 s,47.3℃退火30 s,72℃延伸1 min,45个循环,72℃延伸7 min,4℃保存。应用ISSR体系对5份福建含笑种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性。