双分子荧光互补技术(BiFC)分析玉米SSⅠ与PPDK1之间的蛋白互作

编号 zgly0000823608

文献类型 期刊论文

文献题名 双分子荧光互补技术(BiFC)分析玉米SSⅠ与PPDK1之间的蛋白互作

作者 崔喜艳  张继晓  窦瑶  孙小杰  尹悦佳  刘相国 

作者单位 吉林农业大学生命科学学院  吉林省农业科学院  吉林大学生命科学学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2013(7)

页码 49-53

年份 2013 

分类号 Q753 

关键词 SSⅠ  PPDK1  双分子荧光互补技术(BiFC)  瞬时转化  蛋白质互作 

文摘内容 【目的】:分析玉米胚乳可溶性淀粉合成酶(SSⅠ)与质体型糖酵解途径关键催化酶丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)的蛋白互作关系,揭示可能发生互作的亚细胞位置。【方法】:采用酶切连接的方法构建326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1双分子荧光互补表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶片组织,激光共聚焦显微镜下观察SSⅠ和PPDK1相互作用产生的荧光信号。【结果】:双酶切试验鉴定表明,326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1重组载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;双分子荧光互补试验中,可观测到SSⅠ和PP-DK1相互结合而产生的黄色荧光信号。【结论】:证实SSⅠ和PPDK1能够在植物活体细胞内发生真实的蛋白互作。