编号 zgly0001361135
文献类型 期刊论文
文献题名 家蚕小热休克蛋白基因BmHSP20.8的表达及功能研究
作者 赵恩伟 吕正兵 盛清 陈健 聂作明 王丹 沈红丹 刘立丽 舒建洪 陈剑清 吴祥甫 张耀洲
作者单位 浙江理工大学生物化学研究所浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室
母体文献 蚕业科学
年卷期 2009年03期
年份 2009
分类号 S881.2
关键词 家蚕小热休克蛋白20.8 多克隆抗体制备 亚细胞定位 功能
文摘内容 小热休克蛋白(small heat shock protein,sHSP)是一类受热处理后诱导产生的蛋白家族。从构建的家蚕蛹cDNA文库中获得了一条全长764 bp的基因序列(GenBank登录号:AAG30944.1),其开放阅读框(ORF)长561 bp,编码186个氨基酸。用生物信息学方法对此序列进行同源性分析,表明该序列是一条保守性高达85%的家蚕小热休克蛋白20.8(BmHSP20.8),无跨膜结构,主要分布于细胞质。将该序列的ORF与pET-28a(+)载体连接构建重组质粒,并转化到大肠杆菌BL21进行原核表达,纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔获得抗血清。通过亚细胞定位技术研究BmHSP20.8在正常和热激状态下的家蚕卵巢上皮细胞Bm5和BmN中的变化,结果显示热激后BmH-SP20.8蛋白从细胞质往细胞膜方向迁移。有BmHSP20.8表达的大肠杆菌菌株经48℃处理后,其生存率比未表达BmHSP20.8蛋白的菌株高4倍左右,说明BmHSP20.8蛋白在大肠杆菌中表达能够提高细菌体在高温环境下的生存率。