麻疯树胚乳类F-盒蛋白基因的克隆和载体构建

编号 zgly0000517286

文献类型 期刊论文

文献题名 麻疯树胚乳类F-盒蛋白基因的克隆和载体构建

作者 高帆  王治涛  张淑文  朱疏影  吴迪  张航  徐莺  陈放 

作者单位 四川大学生命科学学院／生物资源与生态环境教育部重点实验室 

母体文献 应用与环境生物学报 

年卷期 2007,13(6)

页码 807-810

年份 2007 

分类号 Q78  Q949.753.5 

关键词 麻疯树  胚乳  F—box基序  亮氨酸重复单位 

文摘内容 通过随机测序从本实验室构建的麻疯树胚乳cDNA文库中获得了一条与多种植物、动物F-盒家族(F—box)序列相似的EST序列，并进一步克隆得到含有完整编码框的cDNA全长和基因组序列(Jc—Fbll)．Jc—FbllcDNA全长1672bp，开放阅读框为1224bp，编码的蛋白质含有407个氨基酸残基．Jc—Fbll推导的氨基酸序列与拟南芥、水稻中的同源F—box蛋白相似性分别为52％和75％；与人、斑马鱼、线虫等动物的F—box蛋白的相似性达到48％～56％．应用PfamSearch寻找功能结构域，发现其除了含有F-盒家族类结构域外，还有富含亮氨酸重复单位(1eucine—richrepeats，LRRs)．比对Jc—Fbll的基因组序列和cDNA序列，发现Jc—Fbll有两个长度分别为331bp和893bp的外显子和一个长362bp的插入序列，符合内含子的GT—AG法则，认为是Jc—Fbll的内含子．水稻、拟南芥基因组中的同源序列也出现了这种两个外显子、一个内含子的结构，且内含子位置较为保守．为了进一步研究麻疯树F—box蛋白的功能，构建了同时含有Jc—Fbll完整开放阅读框序列和绿色荧光蛋白标签的真核表达载体pBll21-Jc—Fbll—GFP，并经酶切鉴定构建成功．。