蚜虫蛋白质组双向电泳体系条件优化

编号 zgly0001468362

文献类型 期刊论文

文献题名 蚜虫蛋白质组双向电泳体系条件优化

作者 武丽娟  樊永亮  宋月  张战凤  刘小凤  刘同先 

作者单位 西北农林科技大学  西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室  农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室  西北农林科技大学  西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室农  业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 S433.89 

关键词 蚜虫  蛋白质组  双向电泳  条件优化 

文摘内容 为优化有效分离蚜虫全蛋白的双向电泳体系,以豌豆蚜Acyrthosiphon pisum(Harris)为材料,比较了不同蛋白提取方法(裂解液提取法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、饱和酚抽提法)、蛋白上样量、IPG胶条p H梯度等条件对蚜虫全蛋白双向电泳的影响。结果表明:不同的蛋白提取方法所获得的豌豆蚜全蛋白提取率有显著差异,其中以饱和酚抽提法的提取率最高,为5.34±0.26 mg/g,且所提取的蛋白种类丰富度也优于其它2种方法;当蛋白上样量为100μg时所得蛋白点为1 793±36个,高于其它上样量;相同条件下选用11 cm p H 3~10非线性IPG胶条时所得蛋白点为1 803±42个,优于p H 4~7的IPG胶条。表明采用饱和酚抽提法进行提取蛋白,选用11 cm p H 3~10非线性IPG胶条,以蛋白银染方法、分离胶浓度为12.5%进行双向电泳时最适蛋白上样量为100μg,所得可识别蛋白质点最高,且重复性试验匹配率高,可用于豌豆蚜蛋白质组学研究。