黄瓜叶片细胞壁蛋白双向电泳体系的建立

编号 zgly0000823739

文献类型 期刊论文

文献题名 黄瓜叶片细胞壁蛋白双向电泳体系的建立

作者 林梓浩  李玉红  董从娟  陈鹏 

作者单位 西北农林科技大学园艺学院  西北农林科技大学生命科学学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2013(9)

页码 91-97

年份 2013 

分类号 S642.201 

关键词 黄瓜  叶片  细胞壁蛋白  双向电泳  条件优化 

文摘内容 【目的】:建立一套适合黄瓜叶片细胞壁蛋白质组学研究的双向电泳体系, 为黄瓜细胞壁蛋白质组学的后续研究奠定基础。【方法】:以黄瓜品种“长春密刺”幼苗叶片为材料, 比较2种不同提取介质(CaClz和LiCl溶液)对细胞壁蛋白的提取效果, 对比IPG胶条梯度、裂解液、上样量及等电聚焦程序对黄瓜叶片细胞壁蛋白双向电泳结果的影响。【结果】:以0.2mol/LCaCl。和3moI/LLiCl溶液依次提取黄瓜叶片细胞壁蛋白, 选用17cmpH3～10NLIPG胶条和裂解液1I(7mol/L尿素、2mol/L硫脲、40g/LCHAPS、10g/LDTT和1mmol/LPMSF), 上样量800μg, 按聚焦程序I(20℃水化14h, 100V30min, 250V30min, 500V30min, 1000V1h, 线性升压5h至10000V, 10000V聚焦6.5h)聚焦后进行双向电泳分离和考马斯亮蓝G-250染色, 可获得重复性好、分辨率高的双向电泳图谱。【结论】:建立并优化了适合于黄瓜叶片细胞壁蛋白质组学分析的双向电泳体系。