杂交鹅掌楸LhFB1基因启动子的克隆及活性分析

编号 zgly0001708237

文献类型 期刊论文

文献题名 杂交鹅掌楸LhFB1基因启动子的克隆及活性分析

作者 刘立盘  钟永达  杨爱红  李彦强  余发新 

作者单位 江西省科学院生物资源研究所江西省观赏植物遗传改良重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2020年06期

年份 2020 

分类号 S792.21 

关键词 杂交鹅掌楸  pLhFB1启动子  转基因拟南芥  GUS染色 

文摘内容 【目的】研究杂交鹅掌楸LhFB1基因启动子（pLhFB1）的活性,为研究该基因功能及相关机制提供参考。【方法】利用染色体步移法（Genome Walking）克隆LhFB1基因上游5′侧翼调控区序列,利用生物信息学软件PlantCARE分析其包含的顺式作用调控元件。构建pCAMBIA1300-pLhFB1重组载体,对本氏烟草幼苗期叶片进行瞬转注射和GUS染色表达。花序浸染法将重组载体转化至野生型拟南芥,GUS组织染色分析其在T2代转基因植株开花期根、茎、叶和花组织中的表达量,并用qRT-PCR对GUS组织染色进行活性验证。【结果】pLhFB1启动子序列长1 780 bp,含有多个TATA-box和CAAT-box及压力响应、激素响应、光信号转导、代谢循环元件。瞬转结果表明,烟草叶片注射部位有蓝色斑点,说明启动子有活性。遗传转化结果表明,转pLhFB1启动子拟南芥根、茎、叶和花组织中都有不同程度的蓝色,且根和茎中的蓝色斑块较深。qRT-PCR结果说明,pLhFB1启动子在拟南芥根、茎、叶和花组织都有表达,与GUS染色结果基本相符。【结论】克隆得到pLhFB1启动子序列,其在转拟南芥植株各组织中都有活性,但以根和茎中较强。