农杆菌介导的Lyz-GFP基因对匍匐翦股颖Penn A-1转化和表达的研究

编号 zgly0001625346

文献类型 期刊论文

文献题名 农杆菌介导的Lyz-GFP基因对匍匐翦股颖Penn A-1转化和表达的研究

作者 安惠惠  马晖玲  李坚  白生军  马祥 

作者单位 草业生态系统教育部重点实验室甘肃农业大学  甘肃省草业工程实验室  中-美草地畜牧业可持续发展研究中心  陆地水循环及地表过程重点实验室中国科学院地理科学与资源研究所 

母体文献 草业学报 

年卷期 2012年02期

年份 2012 

分类号 S688.4 

关键词 匍匐翦股颖  基因转化  溶菌酶Lyz基因  绿色荧光蛋白GFP基因 

文摘内容 以匍匐翦股颖Penn A-1成熟胚为供试材料,建立了其植株高效再生体系。利用农杆菌介导法将溶菌酶与绿色荧光蛋白Lyz-GFP双元基因转入匍匐翦股颖Penn A-1胚性愈伤组织中,经培养获得抗病转基因植株。并对Lyz-GFP双元基因转化Penn A-1的适宜条件进行了研究。研究结果表明,在2.0mg/L 2,4-D+0.1mg/L 6-BA的MS培养基上Penn A-1愈伤组织诱导率最高,可达36%,且质量最好。愈伤组织在MSO+0.5mg/L NAA上分化率最高,达42.5%;浓度为300mg/L的头孢霉素(Cef)可抑制农杆菌LBA4404的生长;Penn A-1胚性愈伤组织经携有pBI121-Lyz-GFP的农杆菌LBA4404(OD600值0.3～0.5)侵染10～15min,共培养3d后,转化愈伤组织生长状况良好,转化率达12.5%,且在后期的生长和转化苗的再生中有良好的表现,转化苗再生率为27.5%;转化植株有较强的荧光表达量,并经PCR检测,获得的2株匍匐翦股颖Penn A-1转化植株中均扩增出750bp的目标基因片断。