农杆菌介导的紫穗槐茎段愈伤组织遗传转化研究

编号 zgly0000686007

文献类型 期刊论文

文献题名 农杆菌介导的紫穗槐茎段愈伤组织遗传转化研究

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 管清杰  柳参奎 

作者单位 东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心 

母体文献 吉林农业大学学报 

年卷期 2010,32(6)

页码 644-649

年份 2010 

分类号 S793.2 

关键词 紫穗槐  农杆菌  茎段  愈伤组织  遗传转化 

文摘内容 采用农杆菌介导法对紫穗槐茎段诱导的愈伤组织进行遗传转化研究。确定了卡那霉素临界耐受浓度为40mg/L。菌液浓度与侵染时间的正交试验结果表明: 侵染菌液OD600为0.8、侵染时间为30min时转化效率最高, 达17.95%。GUS染色检测分析表明: 含pBI121-GUS质粒DNA农杆菌侵染转化的愈伤组织其抗性不定芽和再生植株根和叶均呈蓝色。转化植株叶PCR检测结果表明外源GUS基因已整合到紫穗槐基因组中。以上结果表明建立了以茎段诱导愈伤组织为转化受体、农杆菌介导的紫穗槐高效遗传转化体系。为了验证其可重复性, 又进行了pBI121-GFP基因的转化, T0代再生植株PCR检测整合率达85%, 在488nm蓝光源激发下转化株的顶芽产生绿色荧光, 说明转入的基因在35S启动子下过量表达。此遗传转化体系可应用于转基因育种。