短柄草幼胚再生体系及农杆菌介导转化的初步研究

编号 zgly0000709439

文献类型 期刊论文

文献题名 短柄草幼胚再生体系及农杆菌介导转化的初步研究

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 吴雪莉  刘金星  Klaus  K  Nielsen  杨志民  高彩霞 

作者单位 南京农业大学园艺学院  中国科学院遗传与发育生物学研究所 

母体文献 草业学报 

年卷期 2010,19(5)

页码 9-16

年份 2010 

分类号 S544.032 Q943 

关键词 二穗短柄草  幼胚  愈伤组织  农杆菌  遗传转化 

文摘内容 以二穗短柄草3个品系BDR018,BD21,BD21-3的幼胚为外植体,研究了幼胚大小对胚性愈伤组织诱导和再生的影响。采用携带gus和bar基因双元表达载体(pDM805)的根癌农杆菌菌株AGL1对BDR018品系的幼胚愈伤组织进行了遗传转化。本实验探讨了影响幼胚愈伤组织诱导再生及遗传转化的几个因素。结果发现,幼胚大小介于0.5～1.0mm之间的愈伤组织诱导率最高。随愈伤组织年龄的增加,BDR018,BD21,BD21-3愈伤组织的再生率下降,白化率上升。愈伤组织年龄在5～8周范围内转化效率较高,平均转化效率为38.5%。真空处理5min和0.01%的Silwet L-77处理均可提高转化效率。对转化植株进行GUS基因化学组织检测和PCR鉴定,初步证明外源基因已整合再生植株基因组中。