松材线虫SCAR标记与检测技术

编号 zgly0001413261

文献类型 期刊论文

文献题名 松材线虫SCAR标记与检测技术

作者 陈凤毛  叶建仁  吴小芹  黄麟  谈家金 

作者单位 南京林业大学森林资源与环境学院江苏省有害生物预防与控制重点实验室 

母体文献 林业科学 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 S763 

关键词 松材线虫  SCAR标记  特异引物  检测技术 

文摘内容 将松材线虫RAPD特异片段OPM05-X2100进行分离、回收,与载体pGEM-TVector连接,转化大肠杆菌并培养,对目标克隆测序。根据测序结果,用Oligo5.0软件设计引物,正向引物为M05F2(5’-CGGGT CATGG CTGGA GGTAT CGT-3’),反向引物为M05R1(5’-TGGCT CAATG GCAAA TCCTT CGTA-3’),成功地将松材线虫特异片段OPM05-X2100通过引物对M05F2/R1转化为SCAR-M05-X600。运用SCAR标记引物M05F2/R对枯死松树体内分离的92份线虫样本的DNA进行标记,并对单条线虫经简易方法提取的DNA进行检测。结果表明:引物组合对所有81份松材线虫株系均扩增出一条600bp的清晰、明亮的条带,而对8份拟松材线虫、1份霍夫曼尼伞滑刃线虫、1份大核滑刃线虫、1份长尾属线虫均无扩增产物。该对引物可以检测单条松材线虫。利用这对特异引物组合可构建松材线虫检测试剂盒,实现对松材线虫的快速检测的目标。