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松材线虫两种实用分子检测技术



编号 zgly0000732033

文献类型 期刊论文

文献题名 松材线虫两种实用分子检测技术

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 陈凤毛  叶建仁  吴小芹  谈家金  黄麟 

作者单位 南京林业大学森林资源与环境学院/江苏省有害生物预防与控制重点实验室 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2011,33(4)

页码 149-152

年份 2011 

分类号 S763.1 

关键词 松材线虫  实用分子技术  SCAR标记  实时PCR  检测 

文摘内容 为检验已开发的SCAR标记与实时PCR两种分子检测方法鉴定松材线虫的可靠性, 本文选用线虫未知种样品7个以及已知种样品3个为实验材料, 采用上述两种分子检测方法进行检测, 并且对7个线虫未知种样品进行形态鉴定。结果表明: 1)运用SCAR标记检测, 第2、3、4、7号4个未知种样品与8号松材线虫样品出现了一条清晰、明亮的860bp特异条带, 第1、5、6号样品与9号拟松材线虫、10号大核滑刃线虫均未出现扩增谱带, 表明第2、3、4、7号4个待测样品中含有松材线虫, 而第1、5、6号3个待测样品中不含有松材线虫; 2)运用实时PCR检测, 第2、3、4、7号4个样品与8号松材线虫样品表现有明显的阳性扩增信号, 其余样品均未出现扩增信号, 也无循环阈值(Ct值); 3)对7个未知种样品的形态鉴定结果为: 第2、4、7号样品为松材线虫样品, 3号样品中除松材线虫外还含有其他线虫, 第1、5、6号3个样品不含松材线虫。对于松材线虫的检测, 两种分子检测结果与形态鉴定结果完全一致, 且两种分子检测方法对松材线虫都具有很强的特异性, 都可以在较短时间内对松材线虫进行鉴定。其中SCAR标记检测方法约需2h, 实时PCR检测方法约需1h。实现了对松材线虫幼虫快速检测目标, 检测结果便于判读。

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