板栗疫病菌致病性机理的双向凝胶电泳法研究

编号 zgly0000560699

文献类型 期刊论文

文献题名 板栗疫病菌致病性机理的双向凝胶电泳法研究

学科分类 220.1050;树木生理学

作者 姜明国  何小丹  裴氏秋河  江欢欢  黄永颜  陈保善 

作者单位 广西大学生命科学与技术学院  广西亚热带生物资源保护与利用重点实验室  微生物及植物遗传工程教育部重点实验室  广西民族大学化学与生态工程学院 

母体文献 广西植物 

年卷期 2008,28(1)

页码 117-120

年份 2008 

分类号 Q945.8 

关键词 蛋白质提取  双向凝胶电泳  蛋白质组  板栗疫病菌 

文摘内容 双向凝胶电泳技术是蛋白质组学研究的基础性技术平台。如何得到一张高质量的双向凝胶电泳图谱是进行后续研究的关键。为探索适用于板栗疫病菌可溶性总蛋白的最佳提取条件，从蛋白组学角度来探索板栗疫病菌致病性机理，比较了目前在丝状真菌中常用的两种蛋白质提取方法，制备的蛋白质样品经双向凝胶电泳后，在凝胶上呈现的蛋白质斑点的丰度和分布特点。结果表明，两种方法获得的蛋白质主要集中分布在pH4～7的范围内；TCA-丙酮沉淀法得到的图谱分辨率高但是蛋白质总量很少。裂解液-TCA-丙酮沉淀法得到的蛋白质总量较大，通过cleanupkit处理后图谱分辨率可以达到差异蛋白组的要求。随机提取几个银染蛋白点用MALDI-TOFMS／MS进行分析，可以得到高质量的肽质量指纹谱。表明该样品制备方法可以满足蛋白质鉴定的要求。