家蚕类钙粘蛋白BtR-175基因敲除突变体创制和抗性检测

编号 zgly0001515703

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕类钙粘蛋白BtR-175基因敲除突变体创制和抗性检测

作者 程廷才  林平  付剑锋  蒋亮  马三垣  夏庆友 

作者单位 家蚕基因组生物学国家重点实验室西南大学 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2016年05期

年份 2016 

分类号 S882 

关键词 类钙粘蛋白  基因编辑  黑胸败血芽孢杆菌  抗性  家蚕 

文摘内容 家蚕类钙粘蛋白BtR-175不仅是苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)晶体毒素蛋白的受体蛋白,也是黑胸败血芽孢杆菌(Bacillus bombysepticus)晶体毒素蛋白的受体分子。为建立对黑胸败血芽孢杆菌具有抵抗能力的家蚕品系,采用CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术,设计引导RNA(gRNA)对家蚕BtR-175基因进行精确定点编辑,对蚕卵显微注射重组质粒pU C57-hA 4-Cas9和T-U6-BtR-175后,筛选获得2个碱基插入导致蛋白质翻译提前终止的BtR-175基因敲除突变体,命名为ΔBtR-175。4龄起蚕经口添食黑胸败血芽孢杆菌,结果ΔBtR-175突变体家蚕的死亡率为34.4%±5.8%,野生型家蚕的死亡率为57.8%±8.4%,表明ΔBtR-175对黑胸败血芽孢杆菌的侵染抵抗性显著提高。饲养试验显示ΔBtR-175突变体和野生型家蚕的茧层量没有显著性差异。该突变体有望进一步培育为家蚕抗性育种素材。