利用双向电泳技术分析山羊精子冷冻前后蛋白组的差异

编号 zgly0001383236

文献类型 期刊论文

文献题名 利用双向电泳技术分析山羊精子冷冻前后蛋白组的差异

作者 阮崇美  张子军  任春环  陈龙  张育军  程萧  章孝荣 

作者单位 安徽农业大学动物科技学院遗传育种与繁殖实验室 

母体文献 中国草食动物 

年卷期 2010年04期

年份 2010 

分类号 S827.34 

关键词 山羊精子  二维电泳  蛋白组学 

文摘内容 建立稳定的山羊精子蛋白质双向电泳的技术平台,对精子上样量、蛋白质提取方法、二维电泳程序等相关技术都进行了优化,得到了相对清晰的冻精和鲜精的二维电泳图谱,并运用Image Master TM 2D Platinum软件进行了分析。结果表明:通过改进的热Trizol法提取山羊精子蛋白,当取精子3×107、上样量为150μL时能取得较好的电泳图谱,鲜精的蛋白位点重复性较高的有650个±10个,冻精的蛋白位点重复性较高的有600个±10个。冷冻导致精子蛋白丢失约50个,而且冻精多表现为大分子量蛋白的丢失,大部分分布于60～100kb之间,其中60～80kb之间蛋白丢失约18个,80～100kb之间蛋白丢失近20个,12～60kb之间蛋白丢失近12个。实验初步探明了山羊精子融冻前后精子的蛋白变化规律,为进一步了解精子冷冻损伤的确切机理奠定了基础。