羽毛降解杆状链霉菌S-28遗传转化系统的建立与优化

编号 zgly0001632400

文献类型 期刊论文

文献题名 羽毛降解杆状链霉菌S-28遗传转化系统的建立与优化

作者 张晋龙  马怡茗  舒伟学  李晓霞  柯欣  颜华  贾良辉 

作者单位 西北农林科技大学生命科学学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2018年05期

年份 2018 

分类号 Q933 

关键词 杆状链霉菌S-28  羽毛降解  遗传转化系统  接合转移 

文摘内容 【目的】建立羽毛降解杆状链霉菌（Streptomyces bacillaris）S-28的遗传转化系统,并对其进行优化,为该菌株的遗传改造奠定基础。【方法】以大肠杆菌-链霉菌穿梭整合型质粒pSET152为出发质粒,大肠杆菌（Escherichia coli）S17-1/pSET152为供体,羽毛降解杆状链霉菌S-28孢子为受体进行接合转移试验,并对影响接合效率的培养基种类、MgCl2浓度、热激温度、预萌发时间、供受体比例和接合转移时间等要素进行优化。【结果】确定筛选羽毛降解杆状链霉菌S-28菌株接合转化子的抗生素为安普霉素≥10μg/mL或卡那霉素≥20μg/mL;成功将pSET152转入到杆状链霉菌S-28中。优化的S-28菌株接合转移条件为:以MS为接合转移最适培养基,MgCl2浓度为10mmol/L,孢子萌发条件为40℃热激10min且不进行预萌发处理,供受体比例为10∶1,接合转移时间1820h,此条件下接合转化效率最高达到10-4。【结论】建立并优化了羽毛降解杆状链霉菌S-28的遗传转化系统,接合转化效率最高可达到10-4。