2种启动子驱动下的VaCBF3基因植物表达载体构建

编号 zgly0000758726

文献类型 期刊论文

文献题名 2种启动子驱动下的VaCBF3基因植物表达载体构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 冯连荣  王占斌  宋立志 

作者单位 辽宁省杨树研究所  东北林业大学林学院 

母体文献 沈阳农业大学学报 

年卷期 2011,42(5)

页码 559-564

年份 2011 

分类号 Q781 Q782 

关键词 启动子  rd29A  35S  VaCBF3基因  植物表达载体 

文摘内容 为了探索山葡萄CBF3基因(VaCBF3)对杨树的遗传转化的影响,及组成型启动子和诱导型启动子对转基因植株生长的影响,分别构建由2种类型启动子调控的植物表达载体。根据GenBank上公布的rd29A基因序列设计特异性引物,利用PCR方法从拟南芥基因组DNA中克隆rd29A基因启动子片段,利用限制性内切酶通过酶切、连接构建由组成型启动子35S和诱导型启动子rd29A基因启动子驱动的VaCBF3基因植物表达载体,利用冻融法完成重组质粒对根癌农杆菌LBA4404的转化。试验结果表明,所克隆的rd29A基因启动子片段序列分析表明该启动子片段长度为945bp,与GenBank中基因序列同源性达99%,具有DRE、ABRE、TATA box和CAAT box4个完整的顺式作用元件,具有启动子功能。经过酶切、连接成功地将目的基因与载体质粒连接,并将重组质粒导入至根癌农杆菌LBA4404中,为下一步利用农杆菌介导法对杨树的遗传转化及研究2种启动子的启动效率奠定了一定的基础。