扇脉杓兰AFLP反应体系的建立

编号 zgly0000782644

文献类型 期刊论文

文献题名 扇脉杓兰AFLP反应体系的建立

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 李全健  王彩霞  田敏  李翠新 

作者单位 西南林业大学  中国林业科学研究院亚热带林业研究所 

母体文献 湖南农业科学 

年卷期 2012(1)

页码 107-110

年份 2012 

分类号 S682.31 

关键词 扇脉杓兰  基因组DNA  扩增片段长度  多态性 

文摘内容 通过SDS法、高盐低pH法、常规CTAB法、高盐CTAB法和改良CTAB法提取扇脉杓兰(Cypripedium japonicum Thunb.)幼叶基因组DNA,并对其AFLP反应体系进行了优化。结果表明: 改良CTAB法所提取的DNA电泳条带清晰无污染,A260和A280比值在1.8～2.0,用限制性内切酶酶切后条带均一,酶切时间以4 h为宜。最终确定50μL PCR反应体系的最佳条件为: 预扩增产物稀释20倍4μL,dNTP(2.5 mmol/L)3μL,Mg2(+25 mmol/L)4μL,MseⅠ(10μmol/L)和EcoRⅠ(10μmol/L)各1.5μL,Taq DNA聚合酶(5 U/μL)0.3μL。