根癌农杆菌介导的苜蓿悬浮胚性愈伤遗传转化体系的建立与优化

编号 zgly0001372792

文献类型 期刊论文

文献题名 根癌农杆菌介导的苜蓿悬浮胚性愈伤遗传转化体系的建立与优化

作者 申玉华  李望丰  金太成  常青  殷东旭  王德利  刘立侠 

作者单位 东北师范大学生命科学学院  内蒙古赤峰学院 

母体文献 植物研究 

年卷期 2009年06期

年份 2009 

分类号 S541.9 

关键词 苜蓿  悬浮胚性愈伤  NHX1基因  遗传转化 

文摘内容 苜蓿基因型是限制遗传转化的关键因素之一。本实验通过对7种苜蓿胚性愈伤组织诱导,筛选出一份具有高频再生潜力的基因型公农-1号,并以该基因型为转化平台探索和建立了一套高效的苜蓿遗传转化系统。分析了影响农杆菌共培养转化苜蓿悬浮胚性愈伤的因素,优化了悬浮培养条件,建立的超声波辅助农杆菌介导苜蓿胚性愈伤的遗传转化系统为:以下胚轴诱导的愈伤组织经悬浮培养得到的胚性愈伤为转化材料,乙酰丁香酮为100μmol·L-1、超声波处理时间8s、卡那霉素筛选浓度30mg·L-1、共培养4d,接种于选择培养基上进行筛选和再生。最终,获得了大量的转基因植株,分子检测证实目的基因-角碱蓬液泡膜型Na+/H+逆向转运蛋白基因已经整合到苜蓿基因组中。