苹果SRAP-PCR反应体系的建立

编号 zgly0001378548

文献类型 期刊论文

文献题名 苹果SRAP-PCR反应体系的建立

作者 司鹏  戴洪义  薛华柏  张玉刚  郭俊英  曹尚银 

作者单位 中国农业科学院郑州果树研究所  青岛农业大学园林园艺学院 

母体文献 果树学报 

年卷期 2010年02期

年份 2010 

分类号 S661.1 

关键词 苹果  SRAP-PCR  正交分析 

文摘内容 以苹果(Malus domestica Borkh.)品种Telamon及Telamon×Fuji的F1代为试材,采用改良的CTAB法提取苹果叶片的DNA,利用正交设计L16(45)和直观分析以及方差分析相结合,探讨了Mg2+、dNTPs、Primer、Taq聚合酶、模板DNA用量对苹果SRAP-PCR反应的影响。建立了总体积为10μL的苹果SRAP-PCR反应体系,Mg2+浓度为2.0mmol.L-1,dNTPs浓度为0.8 mmol.L-1,Primer浓度为0.2μmol.L-1,Taq DNA聚合酶含量为0.6 U,DNA含量为60 ng,并含1μL 10×buffer(Mg2+free)。应用该反应体系,用不同的引物组合对48份苹果样品DNA进行SRAP-PCR扩增,结果显示反应体系具有较高的稳定性。