草菇培养料中微生物总DNA的高效提取

编号 zgly0001393363

文献类型 期刊论文

文献题名 草菇培养料中微生物总DNA的高效提取

作者 侯立娟  李玉  孟丽  John A.Buswell  陈明杰  宋金俤 

作者单位 吉林农业大学  上海市农业科学院食用菌研究所  江苏省农业科学院蔬菜研究所 

母体文献 东北林业大学学报 

年卷期 2011年11期

年份 2011 

分类号 S646.13 

关键词 草菇培养料  DNA  微生物  PCR扩增 

文摘内容 比较了化学裂解与酶裂解相结合法、氯化苄法、CTAB法、改良CTAB法、MP土壤试剂盒法和植物试剂盒法6种提取草菇培养料总DNA的方法。结果表明:不同方法的A260/A280比值有较大差异,其中化学裂解与酶裂解相结合法提取DNA的产量最高,而新型植物基因组DNA提取试剂盒提取培养料DNA的产量最低,分别为(2 372.72±28.85)μg/g和(87.67±2.04)μg/g。采用真菌、细菌及放线菌特异性引物进行PCR扩增,结果表明,除氯化苄法没有扩增出目的条带外,其余方法均能扩增出目的条带,说明其均能从草菇培养料中同时有效地提取真菌、细菌和放线菌总DNA。综合评价了各方法的DNA产量、纯度、PCR扩增效果、试验时间、费用成本5个指标,其中采用化学裂解与酶裂解相结合法提取出的DNA产量最高,但所用时间较长;MP土壤试剂盒提取的DNA纯度最高、所需时间较短,但成本较高。