小鼠Prx2正义和反义真核表达载体的构建与表达

编号 zgly0000765597

文献类型 期刊论文

文献题名 小鼠Prx2正义和反义真核表达载体的构建与表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 杨书红  吕兴  罗爱月  赖志文  丁婷  韩凌斐  卢运萍  王世宣 

作者单位 华中科技大学附属同济医院妇产科  郧阳医学院附属太和医院肝胆外科 

母体文献 现代生物医学进展 

年卷期 2011,11(16)

页码 3005-3008

年份 2011 

分类号 Q95 Q75 

关键词 Prx2  正义/反义  真核表达载体  颗粒细胞  小鼠 

文摘内容 目的: 构建小鼠Prx2正义及反义真核表达载体pEGFP-N1-sPrx2、pEGFP-N1-aPrx2并在小鼠卵巢颗粒细胞中表达。方法: 应用RT—PCR技术, 从小鼠卵巢颗粒细胞提取的总RNA中, 获得Prx2基因编码序列的正义及反义片段, 克隆至真核表达载体pEGFP—N1中, 对重组质粒进行酶切和测序鉴定后, 以脂质体介导法转染至体外培养的未成熟小鼠颗粒细胞, 通过荧光显微镜观察和Westernblot检测其在颗粒细胞中的表达改变。结果: 酶切和测序证明重组真核衰达载体pEGFP—N1一sPrx2、pEGFP—N1-aPrx2构建成功, 荧光显微镜观察及Westernblot确认目标蛋白在颗粒细胞中表达增强或减弱。结论: 成功构建小鼠Prx2基因正义及反义真核表达载体pEGFP-N1-sPrx2、pEGFP-N1.aPrx2并在小鼠卵巢颗粒细胞中表达。