桉树无性系叶片蛋白质组双向电泳体系优化

编号 zgly0001533775

文献类型 期刊论文

文献题名 桉树无性系叶片蛋白质组双向电泳体系优化

作者 马松亚  蒋维昕  屈林丰  曹雪宁  谭玲  杨梅 

作者单位 广西大学林学院  广西林业科学与工程高校重点实验室 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2016年04期

年份 2016 

分类号 S792.39 

关键词 桉树  叶片  蛋白质组  无性系  双向电泳 

文摘内容 为了建立适用于桉树叶片蛋白质组研究的双向电泳体系,以尾叶桉Eucalyptus urophyllas广林4号无性系作为试验材料,对蛋白质样品获取方法、双向电泳等电聚焦胶条p H范围、蛋白质上样量、胶条平衡条件以及染色方法进行了优化。结果表明:提取液+酚抽提法最适合桉树叶蛋白质的提取,电泳图谱可检测到850个蛋白质点。7 mol/L尿素+2 mol/L硫脲+4%Chaps+60 mmol DTT 10μL的蛋白质干粉裂解液,裂解效果较好;使用50 mg蛋白质干粉和600μL裂解液所获得的蛋白质浓度较高,为3.97μg/μL。使用p H4~7、24 cm IPG胶条,蛋白质上样量为1 200μg,并加入375 mg碘乙酰胺,采用考马斯亮蓝染色,获得的蛋白点清晰,没有拖尾现象,条纹极少,分布较均匀。