仔猪血清大豆抗原蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

编号 zgly0000831525

文献类型 期刊论文

文献题名 仔猪血清大豆抗原蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

作者 寇亚楠  马良友  罗莹  王希春  吴金节 

作者单位 安徽农业大学动物科技学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2014(3)

页码 17-22

年份 2014 

分类号 S852.43 

关键词 大豆抗原蛋白  仔猪  血清抗体  间接ELISA 

文摘内容 【目的】:研究并建立大豆抗原蛋白血清抗体间接ELISA检测方法。【方法】:首先用大豆抗原蛋白对仔猪进行致敏,然后采用棋盘滴定法确定最佳抗原包被质量浓度及血清稀释倍数,并对其他条件进行优化,最终建立检测血清大豆抗原蛋白11S、7S抗体的间接ELISA方法,确立待测血清判定标准,并对建立的ELISA方法进行重复性、准确性和敏感性检测。【结果】:建立的ELISA方法的最佳反应条件为: 11S抗原蛋白最适包被质量浓度为2.0μg/mL,包被作用时间37℃下2h;将10g/L BSA作为封闭液,37℃封闭1h;待测血清37℃作用1h;酶标二抗最适稀释度为1∶1 500,37℃作用1h;显色剂最佳显色时间15min。7S抗原蛋白的最适包被质量浓度为2.5μg/mL,包被作用时间37℃下2h;将10g/L BSA作为封闭液,37℃封闭1h;待测血清37℃作用1h;酶标二抗最适稀释度为1∶1 500,37℃作用1h;显色剂最佳显色时间25min。11S和7S抗原蛋白间接ELISA检测方法的批内、批间变异系数均小于10%,重复性较好,灵敏度较高。【结论】:建立了仔猪血清大豆抗原蛋白抗体间接ELISA检测方法,该法具有很强的特异性和敏感性,可用于大豆抗原蛋白11S、7S过敏反应的临床诊断。