新城疫病毒La Sota C5株感染性克隆的构建及病毒拯救

编号 zgly0001449214

文献类型 期刊论文

文献题名 新城疫病毒La Sota C5株感染性克隆的构建及病毒拯救

作者 汪军卿  张向乐  孟春春  仇旭升  孙英杰  谭磊  宋翠萍  丁铲 

作者单位 中国农业科学院上海兽医研究所 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2013年06期

年份 2013 

分类号 S852.659.5 

关键词 新城疫病毒  La Sota  感染性克隆  病毒拯救 

文摘内容 将本实验室保存的一株La Sota病毒用有限稀释法接种鸡胚进行纯化,连续传代5次后筛选到1株高血凝效价的纯培养克隆株,命名为La Sota C5,并对其进行全基因组测序,克隆株与亲本株在生物学特性与基因序列上都存在一定的差异。参照La Sota C5株全基因序列单酶切位点,用RT-PCR的方法将基因组分8段扩增,按照病毒基因组的结构顺序,将克隆片段定向插入到TVT转录载体中,成功构建含有病毒全长cDNA的转录载体TVT-La Sota C5。将TVT-La Sota C5与辅助质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有感染性的La Sota株新城疫病毒。病毒的成功拯救为后续基因功能和疫苗载体开发等方面的研究提供了平台。