AIV、NDV和安卡拉病毒多重PCR检测方法的建立及应用

编号 zgly0001571282

文献类型 期刊论文

文献题名 AIV、NDV和安卡拉病毒多重PCR检测方法的建立及应用

作者 张曼  韩飞 

作者单位 杨凌职业技术学院动物工程学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2018年02期

年份 2018 

分类号 S852.65 

关键词 多重PCR  禽流感病毒  新城疫病毒  安卡拉病毒 

文摘内容 【目的】建立鉴别禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)和安卡拉病毒(FAV-4)的多重PCR检测方法。【方法】根据GenBank已登录的AIV的M基因、NDV的F基因和FAV-4的Hexon基因序列,设计合成了3对特异性引物。提取3种病毒DNA/RNA,通过优化多重PCR反应中的引物浓度和退火温度,建立快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检验。应用建立的多重PCR方法对67份临床病料进行检测,并将其结果与已建立的单重PCR检测结果进行比较。【结果】成功建立了能快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,该方法特异性良好,对传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡痘病毒(FPV)、鸡马立克病病毒(MDV)的扩增结果均为阴性;敏感性较强,能检测出的NDV、FAV-4和AIV最低核酸质量浓度分别为24.3,30.4和28.0pg/μL。多重PCR方法临床病料的检测结果与单重PCR检测结果一致。【结论】建立的AIV、NDV和FAV-4多重PCR检测方法方法可以用于临床上3种病原的鉴别诊断。