编号 zgly0001487895
文献类型 期刊论文
文献题名 日本血吸虫PDIA3的原核表达和多抗血清制备
作者单位 上海师范大学生命与环境科学学院 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室
母体文献 中国动物传染病学报
年卷期 2015年01期
年份 2015
分类号 S852.735
关键词 日本血吸虫 SjPDIA3 原核表达 多克隆抗体
文摘内容 为获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)PDIA3(Sj PDIA3)重组蛋白,并制备多克隆抗体血清,本研究以日本血吸虫c DNA文库为模版,利用PCR技术扩增得到PDIA3 ORF全长,并克隆到p ET28a(+)载体中,将得到的重组质粒p ET28aSj PDIA3转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后His-Ni柱亲和层析纯化得到Sj PDIA3重组蛋白,利用重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,Western blot分析重组蛋白的免疫原性。扩增得到长为1482 bp日本血吸虫PDIA3的ORF序列,该序列编码493个氨基酸,含两个硫氧还原蛋白结构域和一段信号肽,无扩膜结构。在原核表达系统中表达得到大小为55 k Da的Sj PDIA3重组蛋白,分析显示其具有良好的抗原性。