落葵皱缩花叶病毒CP基因的原核表达及多克隆抗血清的制备

编号 zgly0001561277

文献类型 期刊论文

文献题名 落葵皱缩花叶病毒CP基因的原核表达及多克隆抗血清的制备

作者 李小琴  张鹏远  任龙辉  代瑾然  王建光  陈穗云 

作者单位 云南大学生命科学学院  西南林业大学生命科学学院  云南香料烟有限责任公司 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2017年10期

年份 2017 

分类号 S432.41 

关键词 落葵皱缩花叶病毒  紫茉莉  cp基因  多克隆抗血清  ID-ELISA  蛋白质印迹法 

文摘内容 以感病紫茉莉叶片为材料,采用RT-PCR方法克隆落葵皱缩花叶病毒（Basella rugose mosaic virus,Ba RMV）的外壳蛋白（coat protein,CP）基因,并构建p ET30a-Ba RMV-cp原核表达载体。将原核表达载体转化大肠杆菌[Rosetta（DE3）Plys S],成功诱导表达得到大小约为40.0 k D的与预期大小相符的融合蛋白（His-CP）。SDS-PAGE电泳完毕后用0.25 mol·L-1的KCl溶液染色,将目的蛋白切胶纯化后免疫新西兰大白兔,制备抗血清。间接酶联免疫吸附法（ID-ELISA）检测该抗体的效价为1︰16 000,Western-blotting分析表明该抗体具有很强的特异性。对野外感病紫茉莉和实验室内接种发病本氏烟检测结果也表明,所制备的抗体具有良好的特异性,可用于大规模样品检测。