昆虫神经毒素BjαIT的表达及杀虫活性

编号 zgly0001338754

文献类型 期刊论文

文献题名 昆虫神经毒素BjαIT的表达及杀虫活性

作者 李洪波  夏玉先 

作者单位 重庆大学生物工程学院基因工程研究中心  重庆市杀虫真菌农药工程技术研究中心  重庆市高校功能基因及调控技术重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2008年11期

年份 2008 

分类号 S482.3 

关键词 昆虫神经毒素  BjαIT  大肠杆菌  毕赤酵母  融合表达  东亚飞蝗  德国小蠊  杀虫活性 

文摘内容 根据毕赤酵母Pichia pastoris密码子偏爱性,不改变毒素蛋白质一级结构,设计合成了昆虫神经毒素BjαIT基因,并分别克隆至大肠杆菌Escherichia coli融合表达载体pPET30-a(+)和毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K。在IPTG的诱导下,神经毒素在大肠杆菌中融合表达,表达产物利用镍亲和层析柱纯化,纯化产物用于制备抗血清和活性测试。采用斑点杂交,筛选得到了较高水平分泌表达重组BjαIT的酵母转化子,摇瓶条件下,毒素表达量最大可达约20mg/L。大肠杆菌BjαIT表达产物对东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis和德国小蠊Blattela germanica没有活性,但酵母表达产物经注射东亚飞蝗和德国小蠊表现出杀虫活性。