草莓果实外源基因瞬时表达系统的建立

编号 zgly0001357183

文献类型 期刊论文

文献题名 草莓果实外源基因瞬时表达系统的建立

作者 刘敏  滕文静  董清华  晁慧娟  李凤岚  邱德有 

作者单位 北京农学院植物科学技术系  国家林业局林木培育重点实验室  中国林业科学研究院林业研究所  中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所 

母体文献 果树学报 

年卷期 2009年01期

年份 2009 

分类号 S668.4 

关键词 草莓  果实  瞬时表达  根癌农杆菌  基因功能 

文摘内容 将东北红豆杉紫杉烷13α-羟基化酶(Taxane13α-hydroxylase,13OH)基因全长cDNA正向插入到pCAMBI-A1304,构建其植物表达载体pCT13OH;将水稻小RNA169d(microRNA169d,miRNA169d)基因前体(precursor)全长DNA正向插入到pCAMBIA1305.1,构建其植物表达载体pCO169d。用电击法把它们导入根癌农杆菌GV3101,获得有关工程菌株。用1mL无菌注射器分别将这2种工程农杆菌悬浮液注射到草莓(Fragaria×ananassa)授粉后1周、2周、3周的果实中,发现授粉后2周果实适宜注射,可用于瞬时表达。对授粉后2周的果实进行不同注射部位、根癌农杆菌不同活化时期和根癌农杆菌悬浮液不同注射量试验,以蒂部注射、根癌农杆菌活化12h和0.5mL悬浮液注射量的效果最好,与结构基因13OH和调节基因miRNA169d相融合的GUS基因都得到表达,瞬时表达成功。