神经毒素基因RjAa17f在Sf9细胞中的表达及活性分析

编号 zgly0001533056

文献类型 期刊论文

文献题名 神经毒素基因RjAa17f在Sf9细胞中的表达及活性分析

作者 孟姣  于欢  周斌  王敦 

作者单位 西北农林科技大学植保资源利用与病虫害治理教育部重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2016年11期

年份 2016 

分类号 Q78  S476 

关键词 棉铃虫  神经毒素基因RjAa17f  Sf9  RjAa17f毒蛋白  杆状病毒真核表达系统 

文摘内容 【目的】在昆虫草地贪夜蛾细胞(Sf9)中表达一种能专一阻断昆虫钠、钾离子通道的神经毒素基因RjAa17f。【方法】运用杆状病毒真核表达系统表达RjAa17f毒蛋白,并用蛋白质印迹对其进行检测;测定RjAa17f毒蛋白引起健康棉铃虫中肠膜电位的变化,并对其毒力进行测定。【结果】通过重组杆状病毒质粒的转染和Western blot检测验证,神经毒素基因RjAa17f的重组Bacmid已经成功转染到Sf9细胞中,且在Sf9中表达出与预测大小一致的RjAa17f目的蛋白;此毒蛋白作用于棉铃虫中肠3~12h后,中肠膜电位与CK相比差异显著,且随着作用时间的延长,棉铃虫中肠膜电位呈逐步升高的趋势,作用9h以后,升高的幅度逐渐降低,趋于平缓。RjAa17f毒蛋白对棉铃虫的LD50为108.12μg/g。【结论】在Sf9细胞内表达出了有活性的RjAa17f毒蛋白,且该毒蛋白对棉铃虫中肠膜电位有显著改变。