恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因的克隆表达及表达产物免疫原性的鉴定

编号 zgly0000520615

文献类型 期刊论文

文献题名 恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因的克隆表达及表达产物免疫原性的鉴定

作者 邱少富  朱虹  檀华  宋立华  何君  端青 

作者单位 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 

母体文献 生物技术通讯 

年卷期 2007,18(6)

页码 897-900

年份 2007 

分类号 Q78  Q959.115.4 

关键词 恶性疟原虫  乳酸脱氢酶  免疫原性  同源性 

文摘内容 目的：克隆表达恶性疟原虫(Hasmodium falciparum，p．f)海南株(FCC1／HN)乳酸脱氢酶(LDH)，并对其免疫原性进行鉴定．为制备抗LDH抗体用于胶体金法快速检测疟原虫奠定基础。方法：应用PCR技术对恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDHpf)基因进行特异性扩增，将扩增产物克隆入表达载体pET-32a(＋)，重组表达载体经鉴定后诱导表达；重组LDHpf(rLDHpf)经纯化后，免疫家兔制备兔抗rLDHpf免疫血清，间接免疫荧光和Western印迹鉴定表达产物的免疫原性。结果：构建了pET-32a／LDHpf重组表达载体，测序后同源性分析显示p．f不同株间LDH氨基酸序列同源性大于98％，不同种间同源性也在90％以上；间接免疫荧光和Western印迹分析显示rLDHpf具有较好的免疫原性。结论：LDHpf基因高度保守；rLDHpf得到高效表达并具有良好的免疫原性。