MiRNA-93-5p对VEGF的转录调控及其与梅花鹿茸细胞增殖的关系

编号 zgly0001479641

文献类型 期刊论文

文献题名 MiRNA-93-5p对VEGF的转录调控及其与梅花鹿茸细胞增殖的关系

作者 李璐  李婷  李沐  吴炎  齐琳  崔东明  胡薇 

作者单位 吉林农业大学 

母体文献 东北林业大学学报 

年卷期 2014年11期

年份 2014 

分类号 Q786 

关键词 鹿茸细胞  miRNA-93-5p  血管内皮生长因子  转录调控  细胞增殖 

文摘内容 为了探讨miRNA-93-5p对梅花鹿血管内皮生长因子(VEGF)的转录调控作用及其与鹿茸细胞生长的关系,分离了鹿茸顶端软骨组织细胞,利用Trizol试剂法提取细胞总RNA,反转录合成c DNA。根据Gen Bank已发表的相关序列设计梅花鹿VEGF基因的3’端非编码区部分序列(3’UTR)特异引物并进行克隆,构建VEGF基因的3’UTR野生型及其突变体序列双荧光素酶报告基因载体并进行荧光素酶活性检测。再将人工合成的miRNA-93-5p模拟物转染鹿茸软骨细胞,MTT法检测鹿茸细胞体外增殖的变化;Western blotting分析VEGF蛋白的表达丰度。结果表明:成功获得了鹿茸组织VEGF基因的3’UTR序列,野生型序列长度为356 bp,突变体长度为336bp。荧光素酶活性检测结果表明,转染野生型质粒组细胞荧光素酶活性降低,而转染突变体组细胞荧光素酶活性无明显变化。MTT法和Western blotting结果显示,鹿茸细胞的体外增殖受到抑制,VEGF蛋白的表达水平下降,且呈时间依赖性。