双向启动子的分离及嵌合基因拼接的优化研究

编号 zgly0001105624

文献类型 期刊论文

文献题名 双向启动子的分离及嵌合基因拼接的优化研究

作者 朱群  白永延  罗士韦 

作者单位 中国科学院上海植物生理研究所  中国科学院上海植物生理研究所 上海200032  上海200032 

母体文献 Journal of Integrative Plant Biology 

年卷期 1989年08期

年份 1989 

关键词 双向启动子  嵌合基因  萤光素酶  中间载体  转化  基因表达 

文摘内容 从带有 pTi15955 TR-DNA 片段的克隆 pAR17出发,经一系列 DNA 重组步骤,我们分离到了—490bp 的双向启动子 DNA 片段。DNA 顺序分析表明,与 pTiAch5一样,pTi15955TR-DNA 的基因1′和基因2′启动子皆具典型的 TATA 盒,它位于起始密码上游90bp 处,但基因1′和2′皆无典型的 CAAT 盒。转录起始可能在基因1′和2′的起始密码上游60bp 处。为了研究嵌合基因5′端启动子的优化拼接以及3′末端结构方向对嵌合基因表达的影响,我们对分离的双向启动子2′进行了改造,将 BamHI 酶切位点移到了起始密码 ATG 处,并构建了三种萤光素酶嵌合基因,经植物基因工程载体 pGV3850,分别将这三种嵌合基因引入了烟草,结果表明,经改造的双向启动子2′要比未改造的强,胭脂碱合成酶基因3′末端当以反向与萤光素酶结构基因相拼时大大降低其基因在转化烟草中的表达。