棉铃虫Ⅰ型几丁质酶的表达

编号 zgly0001689008

文献类型 期刊论文

文献题名 棉铃虫Ⅰ型几丁质酶的表达

作者 古新蓉  麦麦提艾力·阿卜杜纳斯尔  李梦鸽  王新  随慧  包静  刘小宁 

作者单位 新疆大学新疆生物资源基因工程重点实验室 

母体文献 环境昆虫学报 

年卷期 2019年05期

年份 2019 

分类号 S433.4 

关键词 棉铃虫  几丁质酶  表达纯化  酶活性 

文摘内容 昆虫几丁质酶主要参与昆虫蜕皮、围食膜降解、细胞增殖、机体免疫防御、生长因子等重要生理生长发育过程。在本研究中,从NCBI下载棉铃虫几丁质酶序列,并克隆验证正确,构建的系统发育树表明属于Ⅰ型几丁质酶。将不包含信号肽的开放阅读框序列（1 707 bp）与pET28a载体连接,转化至大肠杆菌transetta（DE3）中进行诱导表达,Western blot进一步验证融合蛋白His-HaCHT。用镍柱子纯化融合蛋白,纯化获得的融合蛋白对胶体几丁质有降解活性,其酶活力为0.023μg/mL·s-1。不同龄期的qPCR结果显示,该基因在棉铃幼虫的6个幼虫期以及预蛹蜕皮后均有表达,但HaCHTI在4龄和6龄幼虫阶段表达相对较高,而在1龄、2龄、3龄、5龄幼虫和预蛹表达量较低。这些结果表明,异源表达的棉铃虫的I型几丁质酶对胶体几丁质具有降解活性,可能对棉铃虫正常蜕皮有着重要的作用。