甜槠ISSR-PCR反应体系的正交优化

编号 zgly0000480444

文献类型 期刊论文

文献题名 甜槠ISSR-PCR反应体系的正交优化

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 张文标  金则新  李钧敏  潘冠琼 

作者单位 西南师范大学三峡库区生态环境教育部重点实验室  台州学院生态研究所 

母体文献 浙江林学院学报 

年卷期 2006,23(5)

页码 516-520

年份 2006 

分类号 S792.17 

关键词 植物学  ISSR-PCR  正交设计  优化  甜槠 

文摘内容 对甜槠Castanopsis eyrei进行遗传多样性研究的过程中, 为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果, 利用正交设计对Mg^2+, dNTP, 引物, Taq酶, 牛血清蛋白(BSA)和模板DNA等6种因素5个水平进行筛选和优化。确定甜槠ISSR-PCR最适宜反应体系为: 10μL反应体积中, 1×Taq酶配套缓冲液(10mmol·L^-1 Tris-HCl, pH 9.0, 50mmol·L^-1 KCl, 10g·L^-1 TritonX-100), 1.7mmol·L^-1 Mg^2+, 0.25mmol·L^-1 dNTP, 8.34 nkat TaqDNA聚合酶, 1.5g·L^-1牛血清白蛋白, 6pmol引物, 12ng模板DNA。甜槠扩增时引物UBC846的最适退火温度为56.3℃。