油茶ISSR反应体系建立及优化

编号 zgly0000480243

文献类型 期刊论文

文献题名 油茶ISSR反应体系建立及优化

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 温强  叶金山  雷小林  江梅  黄莉莉  江香梅  徐林初 

作者单位 江西省植物生物技术重点实验室 

母体文献 中南林学院学报 

年卷期 2006,26(6)

页码 22-26,43

年份 2006 

分类号 S792.4 

关键词 林学  油茶  ISSR  反应条件  优化 

文摘内容 以改进的CTAB高盐法提取油茶嫩叶总DNA, 进行简单重复序列间扩增(ISSR)分析, 分别测试了退火温度、模板DNA浓度、Mg^2+浓度。dNTPs浓度, TaqDNA聚合酶用量和是否加入去离子甲酰胺对反应结果的影响。油茶ISSR分析的最适反应体系为t在20μL PCR反应体积中。含20ng模板DNA, 2.5mmol·L^-1MgCl2,0.2mmol·L^-1dNTPs·1UTaqDNA聚合酶,0.5pmol·μL^-1引物。1%去离子甲基酰胺, 扩增程序为, 94℃预变性2min; 94℃变性30π, 52℃退火30s, 72℃延伸90s.反应38个循环;最后在72℃延伸7min。