桉树的ISSR反应体系建立及优化

编号 zgly0000508852

文献类型 期刊论文

文献题名 桉树的ISSR反应体系建立及优化

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 覃子海  黄金使  刘海龙  吴幼媚 

作者单位 广西林业科学研究院 

母体文献 广西林业科学 

年卷期 2007,36(4)

页码 196-198,205

年份 2007 

分类号 S792.39 

关键词 桉树  ISSR  反应条件  优化 

文摘内容 以改进的CTAB法提取桉树嫩叶总DNA，进行ISSR分析，分别测试了退火温度、模板DNA浓度、Mg^2＋浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶用量对反应结果的影响。桉树ISSR—PCR分析较适宜的扩增条件是：25μL PCR反应体积中，buffer(10mM Tris—HCl，pH9．0，50mM KCl，0．1％Triton X-100)，1．25U TaqDNA聚合酶，4种dNTPs各0．2mM，0．4μM引物，2．0mM MgCl2，50ng模板DNA。最佳扩增程序为：94℃预变性5min，然后进行45个循环：9412变性45s，52℃～55℃复性45s，72℃延伸90s，循环结束后72℃延伸7min。