β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因在大肠杆菌中共表达

编号 zgly0000792198

文献类型 期刊论文

文献题名 β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因在大肠杆菌中共表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 高海有  刘正初  段盛文  成莉凤  石岩  冯湘沅  郑霞  郑科  宋志姣 

作者单位 中国农业科学院麻类研究所  中南大学冶金科学与工程学院 

母体文献 微生物学通报 

年卷期 2012,39(3)

页码 344-352

年份 2012 

分类号 Q786 

关键词 β-甘露聚糖酶  木聚糖酶  大肠杆菌  共表达 

文摘内容 【目的】β-甘露聚糖酶和木聚糖酶都属于半纤维素酶, 它们已经同时运用于工农业生产的许多领域。构建β-甘露聚糖酶和木聚糖酶共表达菌株并进行相关评价。【方法】通过设计一个共同的酶切位点, 将菌株BacillussubtilisBE一91中的β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因串联到表达载体pET28a(+)上, 转化大肠杆菌构建了一株能够共表达β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的菌株B.pET28a—mail—xyl。【结果】菌株诱导21h后, 发酵液中β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的酶活分别为713.34U/mL和1455.83U/mL, 是胞内酶活的11.8倍和2.53倍。【结论】SDS—PAGE分析、水解圈活性检测和胞外酶与胞内酶酶活检测表明: 两个酶均以功能蛋白独立分泌到胞外。此外, 与β-甘露聚糖酶和木聚糖酶单独酶解半纤维素相比, 复合酶的酶解效果更好。菌株的成功构建为复合酶制剂(半纤维素酶制剂)的研究和生产奠定基础。