精子介导转基因动物的制备

编号 zgly0000318968

文献类型 期刊论文

文献题名 精子介导转基因动物的制备

作者 高华颖  曹阳  李世辉  任艳  李庆伟 

作者单位 辽宁师范大学生命科学学院  大连理工大学生物化工学院生物工程系  大连森林动物园  大连复星实业生物科技有限公司 

母体文献 遗传 

年卷期 2003,25(3)

页码 283-290

年份 2003 

分类号 Q78 

关键词 精子  转基因动物  脂质体  人乳铁蛋白基因  重组质粒  兔睾丸组织  外源基因  嵌合体 

文摘内容 采用直接注射的方法, 将脂质体包裹的含人乳铁蛋白基因的重组质粒pLNCXHLF注入兔睾丸组织和羊输精管中, 一个月后分别与正常雌兔及正常的母羊交配。所产仔兔均为活体, 经PCR和Southern检测, 转基因仔兔阳性率平均为35%(11/31); 羔羊经引物F1/R1系统PCR检测阳性率为33.3%(4/12), F2/R2系统PCR检测阳性率为25%(3/12)。将流产羔羊组织解剖后提取舌、肺、肝脏、肌肉、皮肤、脑、生殖腺、脾脏、小肠、心脏、肾脏共11种组织的总DNA进行PCR检测, 发现: F1/R1和F2/R2系统PCR检测出阳性信号存在于不同组织; F2/R2 PCR系统检测阳性信号较F1/R1 PCR系统少; 而且各种组织的外源DNA存在的拷贝数不等, 造成阳性信号的强弱程度不同。结果表明: 1)脂质体包裹外源基因转染精子的方法, 可将外源基因导入受精卵, 并得到了较高的转基因阳性率; 2)精子携带外源DNA的整合过程是随机的, 在受精过程和胚胎早期分化过程中可能发生了片段丢失、不完全整合或游离于基因组存在而产生嵌合体。本文的研究结果证明了该方法是一种简捷有效的新途径, 为进一步深入探讨精子介导转基因动物制备可行性奠定了基础, 给精子载体法制备转基因哺乳动物研究提供了有价值的参考。