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关于ISSR反应弥散背景消除方法的几点讨论



编号 zgly0000535703

文献类型 期刊论文

文献题名 关于ISSR反应弥散背景消除方法的几点讨论

作者 杨双  赵江雷  潘菊  李哲  张键  朱秋云  衣万里  胡颖 

作者单位 沈阳市农业科学院 

母体文献 生物技术 

年卷期 2007,17(3)

页码 42-44

年份 2007 

分类号 S637.9 

关键词 ISSR  PCR  弥散 

文摘内容 目的:讨论消除ISSR反应弥散背景的一些方法。方法:对于不同的反应条件,分别进行梯度试验,包括:退火温度(45℃、47℃、49℃、50℃)、不同引物浓度(0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.6μmol/L、0.8μmol/L)、不同模板浓度(50ng、100ng、200ng)及不同纯度。结果:梯度试验结果如图1~10所示。退火温度47℃,引物浓度0.6μmol/L,模板浓度100ng左右,纯度高的模板,在这些条件下得到的电泳图谱比较清楚。结论:导致弥散背景产生的主要原因有:过低的退火温度;不适当引物浓度;较高的模板浓度;还有模板纯度不高。

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