杜鹃红山茶CaAPX基因的克隆、表达及功能分析

编号 zgly0001527800

文献类型 期刊论文

文献题名 杜鹃红山茶CaAPX基因的克隆、表达及功能分析

作者 王江英  范正琪  殷恒福  李辛雷  吴斌  李纪元 

作者单位 中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术研究重点实验室  江苏省连云港市农业科学院花卉研究中心 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2016年04期

年份 2016 

分类号 S685.14 

关键词 杜鹃红山茶  基因克隆  温度胁迫  表达分析  转基因烟草 

文摘内容 [目的]利用分子生物学技术探讨杜鹃红山茶CaAPX基因的表达模式及在模式植物烟草中所起的抗寒、耐热作用,为今后山茶花抗逆育种奠定基础。[方法]根据山茶花同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3’,5’-RACE技术,从杜鹃红山茶嫩叶组织中克隆出抗坏血酸过氧化物酶(APX),命名为CaAPX,基因全长1 097 bp,开放阅读框753 bp,编码250个氨基酸。实时荧光定量PCR对杜鹃红山茶7种组织和温度胁迫下该基因的表达模式进行分析。[结果]表明:CaAPX基因在杜鹃红山茶7种组织中均得到表达,但表达水平不一,表达量由高到低依次为:未成熟果实>嫩叶>花苞>叶芽>种胚>花瓣>花芽,其中,未成熟果实中的表达量是其它组织的2.6811.44倍;温度胁迫处理8 h后该基因呈上调表达,CaAPX基因表达量分别是0 h的3.49和2.67倍。CaAPX基因转化烟草分析表明,过量表达CaAPX基因后,APX活性提高了2.58 4.09倍,抗坏血酸(As A)含量提高了2.673.56倍,并且转基因烟草植株的抗寒、耐热能力也获得提高。[结论]通过过量表达CaAPX基因能够提高烟草植株的抗寒、耐热性,为山茶花抗逆育种提供了科学依据。