编号 zgly0001578466
文献类型 期刊论文
文献题名 豌豆核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶亚基结合蛋白的纯化及特性
作者单位 中国科学院上海植物生理研究所 中国科学院上海植物生理研究所上海200032中国科学院水生生物研究所 上海200032 上海200032
母体文献 植物生理学报
年卷期 1991年03期
年份 1991
关键词 核酮糖1 5-二磷酸羧化酶/加氧酶亚基结合蛋白 纯化 装配 特性
文摘内容 用35S-Met在照光下与豌豆完整叶绿体保温,显示新合成的标记的RubisCO大亚基与结合蛋白形成一复合物,经ATP处理后解离为结合蛋白亚基,同时释放出的标记的RubisCO大亚基参与了RubisCO的装配。豌豆叶片提取液经热处理,硫酸铵分部,DEAE-Sepharose fast flow和Sephacryl S-300柱层析在ND-PAGE,SDS-PAGE上显示为一条带,估计纯度达90%以上,得率比以前报道的高12倍。纯化的结合蛋白表面巯基数经测定为12±1个,总巯基数为36±1个。远紫外CD光谱具有典型的α-螺旋结构的光谱特性,α-螺旋度为39%。此外,以纯化的豌豆结合蛋白制备了多克隆抗体。琼脂糖双扩散实验显示,结合蛋白的抗体与结合蛋白产生一条沉淀线,而与豌豆的RubisCO无沉淀反应,这表明所得到的抗体是高度专一的。