编号
zgly0000806984
文献类型
期刊论文
文献题名
华山松SRAP-PCR反应体系的优化
学科分类
220.1070;森林植物学
作者单位
贵州大学林学院
母体文献
西北林学院学报
年卷期
2012(5)
页码
87-90
年份
2012
分类号
S791.241.04
关键词
华山松
SRAP
反应体系
文摘内容
为建立华山松SRAP-PCR反应体系,研究先采用L16(45)正交设计对影响华山松SRAP反应的5个因子(DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶)在4个水平上进行优化试验。结果表明: 各因素对SRAP反应的影响依次为: Mg2+〉dNTPs〉Taq酶〉DNA模板〉引物;对SRAP反应结果影响较大的3个因子(Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶浓度)进行单因素试验;确立华山松SRAP反应最佳体系为: 20μL的PCR体系中含有Mg2+2.2mmol/L、dNTPs0.25mmol/L、DNA模板60ng、Taq酶0.8mol/s、引物0.8μmol/L。将该体系用于华山松的SRAP扩增能获得稳定、清晰的多态性条带。